Genetic alterations affect immune contexture of non-small cell lung cancer: Ukrainian study

Abstract

Вступ: Хоча роль різних генетичних змін була підкреслена серед факторів, що впливають на відповідь на імунотерапію при немалоклітинному раку легень (NSCLC), взаємозв’язки між онкогенними драйверними варіантами та змінами у циклі імунної відповіді на рак залишаються неясними. Мета: Метою дослідження було виявити зв’язки між молекулярним та імунним контекстом NSCLC. Матеріали та методи: У цьому когортному дослідженні було включено 254 випадки NSCLC (193 аденокарциноми легень (LUAD; 76%) та 61 плоскоклітинні карциноми (SCC; 24%)), для яких були доступні патоморфологічні висновки та дані секвенування нового покоління (NGS). По-перше, оцінювали частоту та спектр генетичних змін в українській когорті. По-друге, було вивчено взаємозв’язок між онкогенними драйверними мутаціями та експресією PD-L1 у NSCLC. По-третє, оцінювали цитотоксичні Т-лімфоцити (CD8+) та макрофаги, асоційовані з пухлиною (CD163+), у зразках з мутаціями EGFR і KRAS, реаранжуванням ALK та LUAD без генетичних змін. Типи імунного мікросередовища пухлини (TME) — immune desert, immune excluded та inflamed — були визначені відповідно до циклу імунної відповіді на рак. Результати: Більше половини (52%) спостережуваних випадків NSCLC мали поодинокі (48,03%) або комбінаційні (3,94%) генетичні зміни в онкогенах. Українська когорта продемонструвала високу частоту мутацій EGFR (18,5%) та реаранжувань ALK (9,4%) з відносно помірною частотою мутацій KRAS (16,9%). Пухлини NSCLC з змінами в EGFR та ALK показували високу експресію PD-L1 та специфічну імунну контекстуру. Кількість CD8+ клітин значно відрізнялася між онкогенно-залежними та «дикого типу» LUAD (p = 0,019). NSCLC, не залежний від онкогенів, демонстрував переважання inflamed TME, багатого на CD163+ макрофаги. Натомість понад половина випадків LUAD з мутацією EGFR мала immune desert TME, тоді як ALK-реаранжовані та KRAS-мутаційні NSCLC здебільшого демонстрували immune excluded TME. Висновок: Висока експресія PD-L1 у NSCLC, зумовленому змінами EGFR та ALK, супроводжувалася переважанням низької імуногенності з переходом до ID TME у пухлинах з мутацією EGFR та IE TME у ALK-реаранжованих і KRAS-мутаційних NSCLC. Подальше вивчення механізмів, що впливають на імунну контекстуру пухлини, необхідне для персоналізованого ведення пацієнтів з урахуванням конкретних механізмів ухилення від імунної відповіді.

Introduction: Although the role of various genetic alterations was highlighted among factors affecting the response to immunotherapy in non-small cell lung cancer (NSCLC), the relations between oncogenic driver variants and changes in the cancer immunity cycle are still unclear. Aim: The study aimed to discover the links between the molecular and immune context of NSCLC. Materials and methods: This cohort study included 254 cases of NSCLC (193 Lung Adenocarcinomas) (LUAD; 76%), and 61 squamous cell carcinomas (SCC; 24%), with pathology reports and next-generation sequencing (NGS) data available. First, the rate and spectrum of genetic alterations were assessed in the Ukrainian cohort. Second, we uncovered the relationship between the oncogenic driver mutations and PD-L1 expression in NSCLC. Finally, T-cytotoxic lymphocytes (CD8+) and tumor-associated macrophages (CD163+) were evaluated in samples with EGFR and KRAS mutations, ALK rearrangements and LUAD with no genetic findings. Immune desert, immune excluded and inflamed types of tumor immune microenvironment (TME) were defined according to the cancer immunity cycle. Results: More than half (52%) of the observed NSCLC cases harbored single (48.03%) or concomitant (3.94%) genetic alterations in oncogenes. The Ukrainian cohort demonstrated a high rate of EGFR (18.5%) and ALK rearrangements (9.4%) with a relatively moderate frequency of KRAS mutations (16.9%). NSCLC tumors with alterations in EGFR and ALK demonstrated a high incidence of PD-L1 expression and specific immune contexture. The number of CD8+ cells varied significantly between oncogene-driven and wild-type LUAD (p = 0.019). Nononcogene-addicted NSCLC demonstrated the prevalence of Inflamed TME rich in CD163+ macrophages. In contrast, over half of EGFR mutant LUAD cases possessed immune desert TME type, while ALK-rearranged and KRAS mutant NSCLC showed mostly immune excluded TME. Conclusion: The high rate of PD-L1 expression in NSCLC driven by EGFR and ALK alterations was accompanied by a prevalence of low immunogenicity with a shift toward ID TME in EGFR mutant tumors and IE TME in ALK-rearranged and KRAS mutant NSCLC. Further discovery of mechanisms affecting tumor immune contexture is needed for tailoring patient management in line with particular mechanisms of immune evasion.