Создание доминантных маркёров для растений

Abstract

Цель работы - конструирование генно- инженерными методами доминантных маркёров растений, содержащих различные нуклеотидные последовательности в области инициации трансляции. В соответствии с этим были поставлены следующие задачи: клонировать регуляторные участки - промотор и терминатор - гена нопалинсинтетазы из Т-ДНК Ti-плазмиды Agrobacterium tumefaciens, который конститутивно работает в растениях; получить набор делеций в районе ATG-кодона; создать векторные молекулы, позволяющие экспрессировать чужеродные гены в растениях; сконструировать доминантные маркеры для растений (гены устойчивости к канамицину) с разной первичной структурой в районе ATG-кодона. В качестве компонентов маркерных генов были выбраны промотор хорошо изученного гена нопалинсинтетазы, а также ген неомицинфосфотрансферазы из Tn5, экспрессию которого можно легко определить как in vivo, по устойчивости клеток к канамицину, так и in vitro, по активности фермента в клеточном экстракте. При цитировании документа, используйте ссылку http://essuir.sumdu.edu.ua/handle/123456789/5671