Influence of antitumor chemotherapeutics on the structure and phosphorus-calcium metabolism of injured long tubular skeletal bones

Abstract

Велика частота виникнення переломів у онкологічних пацієнтів зумовлена зниженням міцності кісток внаслідок розвитку порушень кісткового метаболізму у вигляді остеопорозу, метастатичного враження кісток та патологічних переломів. Необхідна для лікування раку протипухлинна хіміотерапія призначається курсами на тривалий проміжок часу та впливає на кістковий метаболізм, зокрема на мінералізацію кісткової тканини.

Мета роботи. Вивчити структуру та макроелементний склад довгих трубчастих кісток щурів в умовах впливу протипухлинних хіміопрепаратів.

Матеріали та методи. Дослідження проведено на 96 білих лабораторних щурах-самцях 7-місячного віку вагою 230 ± 10 гр, яким наносився дірчастий дефект діаметром 2 мм шароподібною фрезою до кістковомозкового каналу в середній третині діафіза стег ової кістки. Тварини були поділені на контрольну (n = 24) та три експериментальні групи (I, II, III, n = 72), яким після нанесення травми вводили внутрішньоочеревинно протипухлинні хіміопрепарати: I-й (n = 24) – доксорубіцин (60 мг/м²), II-й (n = 24) – 5-фторурацил (600 мг/м²), III-й (n = 24) – метотрексат (40 мг/м²) та повторювали їх введення кожну 21-у добу протягом усього експерименту. На 15‑ту, 30-ту, 45-ту, 60-ту добу після травми тварин виводили з експерименту з наступним вилученням травмованих довгих трубчастих кісток. Досліджувані зразки вивчали за допомогою скануючої електронної мікроскопії та рентгенівської енергодисперсійної спектроскопії. Статистичний аналіз отриманих цифрових показників проводили за допомогою статистичної комп'ютерної програми MX Excel XP з використанням t-тесту Ст`юдента. Відмінності вважали значущими за р ˂ 0,05.

Результати дослідження. Протипухлинні хіміопрепарати сповільнюють формування кісткового регенерату в ділянці дефекту та спричиняють порушення фосфорно-кальцієвого обміну травмованої кістки. Це проявляється зниженням інтенсивності мінералізації новоутвореного органічного матриксу в ділянці дефекту та зниженням рівня кальцію та фосфору в самій материнській кістці та на її межі з регенератом. Найбільш негативний вплив серед протипухлинних хіміопрепаратів на мінералізацію мають доксорубіцин та метотрексат.

Висновки. Застосування протипухлинних хіміопрепаратів доксорубіцину, 5-фторурацилу та метотрексату призводить до сповільнення процесів репаративної регенерації на всіх етапах відновлення після травми та зниження фосфорно-кальцієвого обміну травмованих довгих трубчастих кісток скелету.

The high frequency of fractures in cancer patients is due to a decrease in bone strength which is associated with bone metabolism disorders such as osteoporosis, metastatic bone disease, and pathological fractures. Anticancer chemotherapy is prescribed for long-term periods and affects bone metabolism, in particular mineralization of bony tissue.

Objective. To study the structure and macronutrient composition of long tubular bones in rats under the influence of antitumor chemotherapeutics.

Materials and methods. The study involved 96 white laboratory 7 month-old male rats weighing 230 ± 10 g that were cut by a ball-shaped dental burr to obtain a 2 mm diameter perforation defect to the medullary cavity in the middle third of the femoral shaft. The animals were divided into the control (n = 24) and three experimental groups (Group I, II, and III, n = 72), which were given intraperitoneal antitumor chemotherapeutics after the cut procedure: Group I (n = 24) – doxorubicin (60 mg/m²), Group II (n = 24) – 5-fluorouracil (600 mg/m²), Group III (n = 24) – methotrexate (40 mg/m²). The therapy was repeated every 21 days throughout the experiment. On the 15th, 30th, 45th, and 60th day after the injury, the animals were sacrificed with subsequent removal of the injured long tubular bones. The samples were studied using scanning electron microscopy and X-ray energy dispersive spectroscopy. Statistical analysis of the obtained digital values was performed with the help of MX Excel XP statistical computer program using the Student's t‑test. The difference was considered significant at p ˂ 0.05.

Results. Antitumor chemotherapy slows down the formation of bone regenerate in the area of the defect and causes disorders of phosphorus-calcium metabolism in the injured bone. This is manifested by a decrease in the intensity of newly formed organic matrix mineralization in the area of the defect and a decrease in the level of calcium and phosphorus in the native bone and on its border with the regenerate. Doxorubicin and methotrexate provide the most negative impact on mineralization process among antitumor chemotherapeutic agents.

Conclusions. The use of antitumor chemotherapeutic agents – doxorubicin, 5-fluorouracil and methotrexate – slows down the processes of reparative regeneration at all stages of recovery after injury and reduces the phosphorus-calcium metabolism of injured long tubular bones.